几种常用离子去垢剂的使用

Triton X-100是一种非离子型去垢剂,

分子式：C14H22O(C2H4O)n

用途：Triton X-100是一种比较温和的去垢剂（表面活性剂或称界面活性剂），常作为添加剂使蛋白保持稳定，尤其是膜蛋白。

性质：

1. Triton X-100对细菌等微生物没有杀伤作用。

2. Triton X-100在紫外波段下有光吸收（lambda max = 275 nm and 283 nm in methanol），因此，当缓冲液中存在Triton X-100时不能通过测定280nm光吸收来进行蛋白定量。

3. Triton X-100常与CHAPS等zwitterionic 去垢剂一起使用来纯化膜蛋白，使膜蛋白保持其天然构象。

4.Triton X-100可以提高真核细胞细胞膜的通透性，因此在Immunostaining时常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100的PBS或TBS。

5. Triton X-100非常稳定，密封避光 +2 to +8℃条件下可以长期保存。

6.Triton X-100是透明，略显粘稠，稍微发黄的液体。

7. Triton X-100的密度为1.07 g/ml，pH6.0-8.0（5%的溶液）。

8. Triton X-100可以高压灭菌。

9. 用Triton X-100来裂解细胞时，0.1% Triton X-100就足够了，不过，达到0.5%时也没问题。

10. 蛋白酶K在含1% Triton X-100的溶液中依然保持活性。

11. 可以使用Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161 cartridges 来去除Triton X-100

Tween:

吐温是(TWEEN)的音译,也叫吐温型乳化剂，为司盘（Span，山梨醇脂肪酸酯）和环氧乙烷的缩合物，为一类非离子型去污剂,于聚山梨酯分子中有较多的亲水性基团一聚氧乙烯基，故亲水性强，为一种非离子型去污剂

1.生物学实验中乳化蛋白，在使用时，Tween 和同类型的Triton X-1OO(聚乙二醇辛基苯基醚)非离子型去污剂不破坏蛋白的结构，可减少对蛋白质之间原有的相互作用的破坏。离子型去污剂如SDS则破坏蛋白的结构。

2. 在生物学实验中作封闭剂，封闭剂应该封闭所有未结合位点而不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的标委、也不与抗体或检测试剂有交叉反应。Tween-20有复性抗原的作用，可提高特异性的识别能力。在做westen blot时，用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点，可以降低抗体的非特异性结合。最常见的封闭剂是BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶和Tween-20（0.05 – 0.1%）稀溶液。

3.常作为水包油（O/W）型乳化剂，使其他物质均匀在溶液中分散，主要用于农药、食品、化妆品。与其他乳化剂如月桂醇硫酸钠或司盘类合用，能增加乳剂的稳定性。吐温可用来使精油乳化后溶解于水液体中，完全发挥作用。相对来说，吐温20更温和一些，吐温80的乳化性更强一些

4.药用：

（1）可作某些药物的增溶剂。

（2）有溶血作用，以吐温-80作用最弱。

（3）水溶液加热后可产生混浊，冷后澄明，不影响质量。

（4）在溶液中可干扰抑菌剂的作用。

含Tween20的溶液不可以灭菌，尤其溶液中还存在金属离子时。Tween20对加热比较敏感，温度升高时，颜色会变黑。