2010—2012年嘉兴地区儿童急性呼吸道病毒感染病原学分析
夏克惜 陈娴
浙江省嘉兴市第一医院 314000
呼吸道病毒感染目前在世界范围内仍占据儿童呼吸道感染发病及死亡原因的首位，病原学检测是病因学诊断和制定治疗措施的重要依据。呼吸道合胞病毒( RSV) 、 流感病毒 A 、
B ( IVA ，IVB) 、 副流感病毒 1 、2及 3型( PIV1，PIV2，PIV3) 和腺病毒( ADV) 是呼吸道感染的常见病毒病原， 快速诊断呼吸道病毒感染对于指导治疗、避免不必要的抗生素使用及采取必要的隔离措施有重要意义，因此对儿童呼吸道病毒病原的监测有着非常重要的意义。本研究对连续3年嘉兴地区住院就诊的628例呼吸道感染患儿进行了常见呼吸道病毒检测，现将结果报告如下。
1 资料与方法
1 .1 标本
依据《实用儿科学》第7版中的急性呼吸道感染诊断标准，选取2010年1月 ～2012年12月儿科住院治疗的呼吸道感染患儿628例，年龄为1个月 ～10岁，其中男324例， 女304例，采集咽拭子、气管吸取物、咳漱痰液之一。其中咽拭子采集后 ，放入含4ml 采样液的采样管中；气管吸取物采集5ml ；咳漱痰液采集10ml ，4℃保存，在48h 之内送到中心实验室。
1.2 实验方法 间接免疫荧光法检测呼吸道病毒
1 .2 .1 细胞涂片标本制备： 用吸管打散 NPS 标本后，1 0 0 0 r／m i n离心10m i n ， 沉淀物用10m l PBS洗涤， 再用少量PBS 悬浮，然后点于多孔涂片上，空气干燥后用冷丙酮固定10min 。
1 .2 .2 间接免疫荧光检测：呼吸道病毒间接免疫荧光法( i n d i r e c t i m mu n e f l u o r e s c e n c e a s s a y ，IFA) ) 筛查与确定试剂盒为C h e mi c o n I n t e r n a t i o n a l I n c 公司产品。试剂盒中的筛查试剂为含7种混合单克隆抗体1瓶，确定试剂为单一特异性当克隆抗体7瓶，单克隆抗体分别是 R S V、I V A、I V B 、P I V 1 、P I V 2 、 P I V 3 、A
D V。细胞涂片染色、观察、结果判定按试剂盒说明书操作。当筛查试验为阳性时，再用单一特异性单克隆抗体进行确认检测。
1 .3 统计方法
所有数据采用统计分析软件SPSS 13.0 统计分析。
2 结果
2 .1 I F A检测呼吸道病毒抗原
在628例患儿标本中， IFA 检测到？例( 3 5 ％) 病毒抗原阳性，因其中部分样本为两种病毒混合感染，故共有？例阳性检出结果，其中呼吸道合胞病毒阳性 ？例 ( 2 8 .4 ％) ， 甲型流感病毒 A 型阳性 ? 例( 3 .3 ％) ， 副流感病毒 2型阳性？例( 2 .1 ％) ，腺病毒阳性？例( 1.2 ％) 。见表1。
表1 628例标本呼吸道病毒抗原阳性表
2.2 7 种病毒感染与年龄的关系 在不同年龄儿童中7种病毒感染的分布情况见表1 。可见呼吸道合胞病毒检出率与年龄相关，x 1 6 .9 7 1 ， P=0 .0 0 2 ， 随着年龄增大， 呼吸道合胞病毒的检出率逐渐下降， 1 岁内R S V阳性例数占总阳性例数的6 4 .9 ％。见表2。
2.3 不同性别病毒检出情况 男性患儿样本病毒检出率为 5 2 .3 8 ％ ( 3 3 ／ 6 3 )，女性患儿病毒检出率为5 1 .0 6 ％ ( 2 4 ／ 4 7 ) ，经检验 ，两者差异无统计学意义 ( = 0 ． 0 1 9， P> 0 ．0 5 ) 。
2.4 不同季节病毒检出情况 流感病毒好发于各季节，呼吸道合胞病毒好发于冬季，其次为春夏季节。见表3。
3 讨论
病毒感染是呼吸道感染的重要病因，做相关病原学检测既可避免滥用抗生素，又可了解流行病学情况及疫苗的免疫效果，及时采取免疫措施和必要的隔离防护。2010年1月 ～2012年12月嘉兴地区儿童的病毒病原检测结果表明，呼吸道病毒是儿童呼吸道感染的主要病原，其中呼吸道合胞病毒最常见，其次是流感病毒 A 型、 副流感病毒 2型和腺病毒，应加强防治和监测。本研究结果显示，1 岁以下R S V的检出率为6 0 ．6 ％， 且随年龄增大， 检出率逐渐降低， 这提示R S V与年龄呈负相关，年龄越小，感染率越高。
国内很多报道显示 R S V 感染大部分地区以冬春季流行为主，本研究结果与文献报道一致。连续3年冬春季呼吸道感染儿童均为R S V占据首位，整个冬春季各月份 R S V的
检出率无明显不同，2010 年至2011年， 但2011年至2012年冬春季却在 1 2 月、1 月、2 月出现了R S V检 率的高峰， 而 3 月、4 月开始下降，到5月则未检 出R S V。这说明R S V每年的流行状况并不完全相同。P a r a 感染的好发季节应该是相对较暖的季节。而且在本研究的连续三年中的冬春季各月几乎都有A D V感染的散发病例，却无集中爆发。I f u A、 B ， P a r a I、 Ⅱ在本研究中少见，而且多以混合感染的形式出现。本研究中混合感染共有 8 例 ，多为R S V合并感染( 其中5 例为R S V合并其他病毒感染) ，可能与儿童免疫功能低下有关。病毒感染造成气道上皮的损伤，促使了其他病菌的入住。
控制和治疗呼吸道感染的最佳时机是感染早期，常规检测方法如病毒培养分离，耗时费力， 对细胞培养要求高，敏感性较低、周期较长，不能满足临床早期诊断和治疗的需要。而血清学检测用于疾病的早期诊断灵敏度不高。电镜技术检测阳性率不高，价格昂贵。分子生物检测实验条件要求非常严格，以避免假阳性，同时需要精密先进的仪器设备，应用受到限制。本实验方法简便、快速，特异性强，敏感性高，适于临床运用。
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表 1 I 1 0例 A R I 病毒检测结果
病原体名称 阳性份数 阳性率( ％)
表1 I V ， R S V 在不同年龄组的检出率【 例( ％) 】
表2 I V， R S V 在不同季节的检出率【 例( ％) 】