[名称]肥达反应

【名称】肥达反应

【英文名】Widal test

【别名】肥达氏反应

【概述】

伤寒、副伤寒患者发病12天后血清中可产生特异性抗体,并逐渐上升,至第4周达高峰,以后逐渐下降。肥达反应,又称伤寒血清凝集试验,是诊断伤寒和副伤寒的血清学试验,以检查血清中抗体效价及其增长幅度。

【原理】

人类感染伤寒或副伤寒沙门菌后,约经1~2周即可在血清中出现抗体(凝集素),此种抗体与伤寒、副伤寒沙门菌相混合,在适当电解质参加下可出现凝集现象。肥达反应是用伤寒沙门菌的H(鞭毛)和O(菌体)以及甲型(A)与乙型(B)副伤寒沙门菌的标准液与病人血清做凝集试验,常用于伤寒、副伤寒的辅助诊断。

【试剂】

(1)诊断菌液:生物制品研究所有商品供应。一般包括伤寒沙门菌H、O,副伤寒沙门菌A、B。用前按使用说明稀释至适当浓度(一般为每毫升含10亿菌体)。但应注意有效期限,如出现自凝者不应使用。

(2)被检血清(可以不加温灭能)。

(3)生理盐水(8.5g/L)。

【操作方法】

(1)准备4排小试管,每排7支,标明记号。

(2)另取中号试管1支,加入生理盐水3.8ml及被检血清0.2ml(吸注液应将吸管外壁拭净,注液时把吸管插至管底,以防过多沾于试管内壁)。

(3)用吸管将上述二者混匀(需用吸管连续吸注3次,吸时深入液面下,注时离开液面)使成1∶20的血清稀释液。

(4)吸取上述1∶20血清稀释液2ml,按每管0.5ml液量分别加入各排 之第1管。

(5)于上述中号试管内加入生理盐水2ml并混匀,此种血清经2倍稀释(由1∶20稀释成1∶40)。

(6)再吸取此1∶40血清稀释液2ml,按每管0.5ml液量分别加入各排之第2管。

(7)如此连续稀释到各排第6管为止。各排的第7管只加生理盐水0.5ml,不加血清,作为抗原对照。此时各排第1至第6管的血清稀释度依次为1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640。

(8)将前述的四种诊断菌液分别加于1、2、3、4各排的每一试验管及抗原对照管内,每管0.5ml。此时各排第1至第6管的血清加入等量菌液而又稀释1倍,血清最后稀释度已成为1∶40、……1∶1280。

(9)将所有试管摇匀后,置37℃温箱或水浴过夜(或56℃2~4h)以促进反应,按时观察结果。

【正常值】

O∶O~1∶80 (0~1∶80)

H∶O~1∶160 (0~1∶160)

A∶O~1∶80 (0~1∶80)

B∶O~1∶80 (0~1∶80)

C∶O~1∶80 (0~1∶80)

【临床意义】

(1)升高:

①O、H凝集价均升高,可诊断伤寒。

②O及A、B、C其中之一凝集价升高时,可诊断副伤寒甲或乙或丙型。 ③H凝集价升高而O凝集价不高者:

A.曾注身接种伤寒疫苗者。

B.曾患过伤寒病者。

C.极少数伤寒患者因O凝集价被Vi抗原影响而不增高。

D.其他沙门菌属感染者。

(2)注意事项:

①发病第1周者50%阳性,第2周者80%阳性,第4周者90%以上阳性,故应多次检查,若凝集价随病程递增,才有诊断价值(病程早期和晚期)。

②阴性反应亦不能排除伤寒,约有10%伤寒病人的肥达反应始终为阴性。 ③应同时作血、骨髓、尿、粪细菌培养。

【附注】

(1)少数伤寒患者整个病程“O”抗原可呈阴性反应,尤其是营养不良和抗体免疫功能缺陷者,以及免疫功能尚未完善的幼儿,或者早期已使用大量抗生素的病人可出现假阴性。

(2)曾接受过伤寒,副伤寒疫苗注射,感染过布氏杆菌病或流行性感冒时,H凝集价可升高,O凝集价较低。

(3)结核杆菌、败血症、传染性肝炎、其他沙门菌感染有时也可出现高凝集价,呈假阳性。

(4)本试验的凝集价高低,不能作为伤寒、副伤寒的疗效判断标准。


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